NuSmart®核酸直接釋放技術(shù)在細(xì)胞STR中如何應(yīng)用
在2017年,有調(diào)查機(jī)構(gòu)抽查了中國(guó)28個(gè)研究機(jī)構(gòu)中保存的278 個(gè)細(xì)胞系,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行鑒定。最終結(jié)果顯示,有128個(gè)細(xì)胞系是錯(cuò)誤,錯(cuò)誤率高達(dá)46%。目前ICLAC、ATCC等quan威機(jī)構(gòu)都將STR方法作為鑒定細(xì)胞系和細(xì)胞是否交叉污染的金標(biāo)準(zhǔn)方法。但是實(shí)驗(yàn)室工作人員往往沒(méi)有認(rèn)識(shí)到STR鑒定的重要性,反而有以下誤區(qū):
1、原代細(xì)胞不需要做STR鑒定;
2、購(gòu)買了帶有STR報(bào)告的細(xì)胞進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室以后就不再需要做STR了;
3、通過(guò)其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行鑒定,無(wú)需做STR鑒定;
4、細(xì)胞系只需要有80%匹配,就可以判斷為同源;
操作流程如下圖。只需要提供超過(guò)100個(gè)細(xì)胞就可以做STR鑒定,可以選擇NuSmart®細(xì)胞和組織PCR試劑盒進(jìn)行DNA提取和STR位點(diǎn)擴(kuò)增。滿足以下條件則要求準(zhǔn)備STR報(bào)告:
1、發(fā)表文章或申請(qǐng)課題經(jīng)費(fèi)前;
2、使用細(xì)胞進(jìn)行臨床治療(試驗(yàn))前;
3、準(zhǔn)備凍存保種或已凍存多年的細(xì)胞;
4、一個(gè)涉及到細(xì)胞試驗(yàn)項(xiàng)目開始/結(jié)束時(shí);
5、新得到的細(xì)胞或?qū)嶒?yàn)室傳5代以上的細(xì)胞;
6、細(xì)胞系表現(xiàn)不穩(wěn)定或結(jié)果與預(yù)期差別較大;
7、異體細(xì)胞移植后嵌合情況檢查。
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